タンパク質精製時に溶解ステップでDNaseとリゾチームが使用されるのはなぜですか?

タンパク質精製時に溶解ステップでDNaseとリゾチームが使用されるのはなぜですか?
Anonim

回答:

タンパク質画分を精製するには

説明:

(たいていは特定の)たんぱく質を精製しているのなら、できる限り多くのゴ ミを取り除く必要があります。

それはあなたがどのタンパク質の後にいるかによって異なりますが、一般的には特にそれは良い考えです。 準備する できるだけ多くの不純物を取り除くための精製。

1:

タンパク質は一般に大きく、そして結果的にあなたの(超遠心分離)画分の低い方のバンドに現れるので、あなたが精製しているタンパク質が心配のようなものであるなら特に、あなたはあらゆる核酸を取り除きたいです。 Pol1, 逆転写酵素 または複製/転写/翻訳に関与する他の酵素

あなたはDNAseを使用することによってサンプル中に存在する核酸を分離することができます:これはDNAをその構成部分に完全に加水分解するでしょう。

あなたの心に、さまざまなDNAseがあります、それらのメカニズムとそれらの基質に対する特異性ですべて異なります。使用されたDNAseに応じて、それはどちらかを示すことができます 遠藤 または Exo- ヌクレアーゼ活性…

もっと言えば、 RNAse RNAは通常、タンパク質の浮力/画分範囲内にあり、タンパク質に結合することができるので、がより適している。

2:

リゾチーム :少なくとも2つの機能を持つ酵素:

それは酵素を脱グリコシル化する:血流中に運ばれる大部分のタンパク質はグリコシル化されている:それらはそれらに結合した少数の糖分子を有する。リゾチームは糖残基を除去します。

それはまたそれらを引き起こすグラム陽性菌の細胞壁を破壊する能力があります 溶ける 。 (グラム陽性菌からタンパク質を精製したい場合)

核酸や糖の破片などの分解生成物は、「軽い」浮力のために遠心チューブの一番上の部分に現れます。