クロマトグラフィーイオン交換とは何ですか? +例

クロマトグラフィーイオン交換とは何ですか? +例
Anonim

回答:

それは、それらの電荷および材料への結合特性に基づいて異なるタンパク質を分離するためのプロセスである。

説明:

異なるpHでは、異なるタンパク質は異なる電荷を帯びています。設定したpHにタンパク質の混合物を入れることで、異なる電荷特性を持つタンパク質を含む混合物を作ることができます。

このタンパク質の混合物が、電荷を有する材料を含むカラムに注がれると、カラムは反対の電荷内でタンパク質に結合する。

その後、さまざまな量のイオンを含むさまざまな溶液を使用して、カラムからタンパク質を溶出させることができます。

たとえば、特定のタンパク質を精製したいタンパク質の混合物があるとします。特定のpHで目的のタンパク質がプラスに帯電していることがわかっている場合は、マイナスに帯電した物質を含むカラムに混合物を注ぐことができます。

電荷を帯びていない、または負に荷電している場合は、すべてのタンパク質がカラムを通ってまっすぐに流れます。その後、カラムにプラスイオンをあふれさせることでプラス電荷を帯びたタンパク質を放出させることができます。この競合により、目的のタンパク質が溶出します。

これがこの例です。

各トレイは異なる濃度の緩衝液を含み、175mMの試料(左上角)に見られるように、緩衝液中のイオンと緩衝液中のイオンとの間に競合があるため、非常に少量の赤/褐色タンパク質が荷電膜に結合した。膜上の荷電結合部位のためのタンパク質(緩衝剤中のイオンは、それらがより多く存在し、従ってそれらがタンパク質の結合を妨げたために「勝った」)。右下のサンプルでは、 結合部位について競合するイオンが少ないため、多くのタンパク質が膜に結合しています。

このビデオでは、作動中の陰イオン交換クロマトグラフィーを見ることができます: