回答:
これを行うには、いくつかのステップがあります。私の悪い英語を無視してください。それでもプロセスを理解できることを願います。
説明:
これはあなたが思うほど難しいことではありません。
子牛の胸腺からDNAを分離したいとしましょう。あなたはこれらの指示に従う必要があります(私の知る限りではこれらは同じですが、小さなバリエーションがあります)。
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3グラムのうち3枚を取り、できるだけ細かく切ります。
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1ピースあたり75 mLの食塩水 - クエン酸ナトリウム(SSC)を入れてブレンダーに入れ、ブレンダーの刃がSSCで完全に覆われていることを確認します。必要に応じて胸腺を追加します。
SSCは細胞膜が溶解していることを確認します。
すべてが滑らかになるまでブレンドを続けます。
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遠心分離機用のチューブに入れて、遠心分離機が壊れないように別のチューブでそれを風袋引き
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チューブを遠心分離機に5000 rpmで20分間入れる
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遠心分離機からチューブを取り出すと、2つの成分が入っているのがわかります。底には固形物があり、これはペレットと呼ばれ、これはDNAと共に細胞核を保持します。また、上清と呼ばれる液体状の物質も見られます。これはSSCと溶解した細胞膜で構成されています。
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上澄み液を一回の液体の動きで注ぎ出します。これをデカンテーションと呼び、これでペレットが残ります。
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ペレットがちょうどNaClで覆われるように、ペレットと一緒にチューブに少量の2.2M NaClを入れる。 NaClはDNAを囲むタンパク質を沈殿させます。
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空の試験管または撹拌棒でそれを撹拌する。最終的には2つのコンポーネントを入手するべきです。下部にタンパク質、上部に粘性流体があります。
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ピペットで粘性のある液体を取り出し、粘性のある液体と一緒にタンパク質を飲まないように注意してください。 (ごく小さいタンパク質片は避けるのが非常に難しいが、できるだけ多くのタンパク質を避けようとする)
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ピペッティングした粘性のある液体をビーカーに入れ、2倍量のエタノールをそれに加える。あなたはそれをDNAと混合したくないのでしかし、エタノールを穏やかに追加します。エタノールと粘性流体の間の界面に、DNAの泡が浮上してくるのが見えるはずです。
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ガラス棒で静かに攪拌すると、DNAは負に帯電しているため、棒に付着します。
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試験管に入れ、SSCで溶かします。
それから特別な機械があなたがどれだけのDNAを単離したか、そしてそれがどれほど純粋であるかをあなたに言うことができる。