
回答:
下記参照…
説明:
制限酵素は特定の配列で切断するので、同じ制限酵素を使用しなければならないため、同じ相補的な粘着末端を持つフラグメントが生成され、それらの間に結合が形成される可能性があります。
一緒に使用できる特定の互換性のある制限サイトがあります。 Xho1およびSal1は例である。それらの粘着末端は一致しているので、それらは一緒に結紮することができる。しかし、結紮はXho1とSal1の両方の部位を死滅させるので、(結紮位置で)再び切断するためにこれらのどちらも使用することはできません。
エキソヌクレアーゼまたはPCRを使って、ほとんどの粘着末端を作ることもできます(5
または3
このようにして鈍い切断部位に結紮することができます - しかしこれは一般的に鈍い部位を殺すでしょう。